液相色譜柱采用了新型的鍵合和端基封尾技術(shù)，能夠提供的色譜峰形，這較大地提高了酸、堿、中性化合物在低、中pH條件下的分離度和定量分析的準確性。
 

　　較常用的液相色譜柱填充劑為化學鍵合硅膠。反相色譜系統(tǒng)使用非極性填充劑，以十八烷基硅烷鍵合硅膠較為常用，辛基硅烷鍵合硅膠和其他類型的硅烷鍵合硅膠(如氰基鍵合硅烷和氨基鍵合硅烷等)也有使用。正相色譜系統(tǒng)使用極性填充劑，常用的填充劑有硅膠等。離子交換色譜系統(tǒng)使用離子交換填充劑;分子排阻色譜系統(tǒng)使用凝膠或高分子多孔微球等填充劑;對映異構(gòu)體的分離通常使用手性填充劑。
 

　　液相色譜柱填充劑的性能(如載體的形狀、粒徑、孔徑、表面積、鍵合基團的表面覆蓋度、含碳量和鍵合類型等)以及色譜柱的填充，直接影響供試品的保留行為和分離效果。孔徑在15nm(1nm=10Å)以下的填料適合于分析分子量小于2000的化合物，分子量大于2000的化合物則應選擇孔徑在30nm以上的填料。除另有規(guī)定外，分析柱的填充劑粒徑一般在3μm~10μm之間。粒徑更小(約2μm)的填充劑常用于填裝微徑柱(內(nèi)徑約2mm)，使用微徑柱時，輸液泵的性能、進樣體積、檢測池體積和系統(tǒng)的死體積等必須與之匹配;如有必要，色譜條件也需作適當?shù)恼{(diào)整。當對其測定結(jié)果產(chǎn)生爭議時，應以品種正文規(guī)定的色譜條件的測定結(jié)果為準。
 

　　1.溫度的要求
 

　　以硅膠為載體的普通鍵合固定相的使用溫度通常不超過35℃，為改善分離效果可適當提高色譜柱的使用溫度，但不能超過60℃。
 

　　2.流動相的要求
 

　　流動相的pH值應控制在2~8之間。當pH值大于8時，可使載體硅膠溶解;當pH值小于2時，與硅膠相連的化學鍵合相易水解脫落。當色譜系統(tǒng)中需使用pH值大于8的流動相時，應選用耐堿的填充劑，如采用高純硅膠為載體并具有高表面覆蓋度的鍵合硅膠填充劑、包覆聚合物填充劑、有機-無機雜化填充劑或非硅膠填充劑等;當需使用pH值小于2的流動相時，應選用耐酸的填充劑，如具有大體積側(cè)鏈能產(chǎn)生空間位阻保護作用的二異丙基或二異丁基取代十八烷基硅烷鍵合硅膠填充劑，或有機-無機雜化填充劑等。